每10個(gè)耳聾患者當(dāng)中，有5個(gè)可能因遺傳引起。但鮮為人知的是，遺傳性耳聾也可以通過基因檢測(cè)技術(shù)提前干預(yù)，避免出現(xiàn)出生缺陷和后天性耳聾。

遺傳性耳聾是如何檢測(cè)出來的?近日，我們走進(jìn)成都某獨(dú)立醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，探秘耳聾基因檢測(cè)全過程。

據(jù)了解，父母雙方聽力正常，雙方家族中也沒有耳聾患者，其子女仍有出現(xiàn)遺傳性耳聾的幾率。正常人群耳聾致病基因的攜帶率為6%。

要進(jìn)檢測(cè)區(qū)需層層消毒

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室果然“戒備森嚴(yán)”，密閉的大門和鍵盤鎖顯示，除了相關(guān)技術(shù)人員，其他人等都難以進(jìn)入。進(jìn)入大門，要想到達(dá)實(shí)驗(yàn)室的核心檢測(cè)區(qū)域，先要穿越一個(gè)狹長(zhǎng)的“緩沖間”，消毒、防護(hù)，完成工作人員要在這里換上已消毒的白大褂及相應(yīng)的清潔“程序”后，才能繼續(xù)前行。而檢測(cè)區(qū)域內(nèi)部被分割成很多個(gè)獨(dú)立通風(fēng)的密閉小間，分別承擔(dān)不同的操作任務(wù)，幾乎每個(gè)小房間外都附帶有這樣的緩沖區(qū)域，要進(jìn)入任何一個(gè)操作間都要重新更換工作服，并戴上頭套、口罩、手套和鞋套等防護(hù)工具。

“不同操作間的專用工作服顏色也不同，目的是防止交叉感染。”實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人張治位博士介紹。比如試劑準(zhǔn)備間是綠色，PCR室是淺藍(lán)色，其他還有粉紅、深藍(lán)等。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所有工作服將分批次消毒并送回專屬操作間，不能混合使用。至于頭套、手套等則是一次性用品，同樣限定在一個(gè)操作間內(nèi)使用。此外，因做完一例基因檢測(cè)要在多個(gè)操作間之間穿梭，為防止交叉感染，每個(gè)操作間只能進(jìn)行一個(gè)單項(xiàng)任務(wù)，房間的設(shè)置遵循“單向循環(huán)”原則，即按照檢測(cè)流程依次向縱深分布。這樣，檢測(cè)將按順序走過試劑準(zhǔn)備間、樣本制備間、PCR室、芯片雜交室和掃描室，既不能倒退，也不能跳躍前行。

檢測(cè)流程：

第1步：樣本提取

42名聽障患者的基因樣本都來自于他們的血液，但提取一個(gè)耳聾基因樣本，有三道工序，即準(zhǔn)備反應(yīng)試劑，從血樣中提取出基因組遺傳物質(zhì)，再將二者混合。

首先，工作人員進(jìn)入試劑準(zhǔn)備間，配好所需的反應(yīng)試劑，以備接下來的基因擴(kuò)增之用。反應(yīng)試劑看上去是一管透明液體，僅有18微升，里面含有熒光分子。在掃描過程中，肉眼無法識(shí)別的熒光分子將附著在耳聾基因上，依靠激光誘發(fā)熒光的特質(zhì)，讓不可視的基因性狀變得可以識(shí)別。配好的反應(yīng)試劑隨后將進(jìn)入操作間的傳遞窗。傳遞窗連接著相鄰的操作間。為確保基因防護(hù)萬無一失，試劑和基因芯片不能被帶出操作間，要進(jìn)入下一環(huán)節(jié)必須通過傳遞窗，在一方窗門未關(guān)緊的情況下，另一端的窗口也無法打開。隨后，工作人員換好新“裝備”進(jìn)入樣品制備間，從事先采集的血樣中抽取兩微升，并與反應(yīng)試劑充分混合。然后，耳聾基因樣本將接受“質(zhì)檢”，學(xué)名“定量”，其實(shí)就是稱重。當(dāng)重量達(dá)到100納克/微升的標(biāo)準(zhǔn)時(shí)才算合格，否則將干擾后續(xù)工作。

第2步：基因擴(kuò)增

血液中含有人體全套基因序列，大約有3萬個(gè)基因信息，但與耳聾相關(guān)的只有4個(gè)。反應(yīng)試劑要做的，就是“找到”這4個(gè)耳聾基因，以便有目的地放大。

基因樣本提取完成后，還不能立即進(jìn)行檢測(cè)。“血液中提取到的基因數(shù)量極微，不足以被檢測(cè)到，必須擴(kuò)增十萬甚至千萬倍，這就需要經(jīng)過PCR技術(shù)，也就是基因擴(kuò)增。”張治位解釋。

PCR技術(shù)的原理十分復(fù)雜，不過從其表現(xiàn)形式來看，就是將樣本反復(fù)加溫、旋轉(zhuǎn)的過程。在專用儀器內(nèi)，基因樣本先要經(jīng)受95度的高溫“烘烤”1分30秒，然后略微降溫至60℃，30秒后再升至72℃加熱30秒，再提高到95℃……如此35個(gè)循環(huán)之后，耳聾基因的拷貝數(shù)將被放大10的6次方到8次方倍。現(xiàn)在的基因樣本濃度變得非常高，極容易彌散到空氣中，需要密封保存。

第3步：“芯片雜交”

接下來將進(jìn)入最關(guān)鍵的生物芯片制作環(huán)節(jié)，也就是“芯片雜交”，包含了分離患者基因序列，并與人工合成的基因片段相結(jié)合兩個(gè)步驟。

在基因序列圖上，基因呈現(xiàn)出螺旋狀的雙鏈體系，每個(gè)鏈條間靠一種特殊的力連接。據(jù)介紹，真正檢測(cè)的只是患者基因的單鏈片段，所以需要通過加熱破壞原本穩(wěn)定的雙鏈體系，從而分離出單鏈片段。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室將人工合成與耳聾基因相關(guān)的另一個(gè)單鏈片段。然后將兩個(gè)單鏈片段放置在4厘米長(zhǎng)、2厘米寬的玻璃芯片上。“人工合成的是已知信息的基因片段，按照生物學(xué)中堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，它將跟患者的基因片段自動(dòng)組合。如果患者的癥狀由遺傳導(dǎo)致，就會(huì)出現(xiàn)基因排列錯(cuò)位的現(xiàn)象。”張治位說。

第4步：診斷結(jié)果

技術(shù)人員說，正常人的基因有特定的排列順序，如果出現(xiàn)錯(cuò)位，就意味著患者的病癥是基因缺陷引起的。不同的錯(cuò)位現(xiàn)象又代表著不同的致病原因。

為了促進(jìn)雜交效率，耳聾基因?qū)⒃俣冉邮?ldquo;烤驗(yàn)”———在50℃的環(huán)境下旋轉(zhuǎn)1小時(shí)。之后，芯片將進(jìn)入洗干機(jī)，洗掉不相干的熒光信號(hào)，甩干水分，便于電腦掃描。到這時(shí)，基因終于可以正式進(jìn)入檢測(cè)環(huán)節(jié)。電腦顯示屏上，基因片段是若干排綠色的小圓點(diǎn)，專業(yè)人員能從中辨別出患者致聾的癥結(jié)所在。

據(jù)了解，此次接受檢測(cè)的42名聽障患者中共有16人屬于遺傳性耳聾，其中4人為先天性耳聾，4人對(duì)特定藥物敏感，例如鏈霉素、慶大霉素等抗生素，因后天使用此類藥物致病。還有6人患有大前庭導(dǎo)水管綜合癥，對(duì)他們而言，需要盡量避免外力刺激，掌摑、腦部撞擊等行為，否則可能誘發(fā)耳聾。

孕前就可知道子女 出現(xiàn)遺傳性耳聾的幾率

由遺傳導(dǎo)致的耳聾，目前沒有有效的恢復(fù)聽力的手段。但這并不等于不可預(yù)防，基因檢測(cè)就是最為有效的一種手段。通過基因檢測(cè)，父母在孕前就可了解到子女出現(xiàn)遺傳性耳聾的幾率，并在孕中對(duì)胎兒進(jìn)行檢測(cè)，看其是否存在遺傳性耳聾。聽力正常的新生兒則可盡早篩查出是否為藥物性耳聾基因攜帶者或大前庭導(dǎo)水管綜合癥患者，及早預(yù)防，防止接觸誘因，避免或延緩聽力下降。對(duì)出生就重度耳聾或全聾的新生兒，可以明確病因，如確定遺傳引起的，就可以盡早配助聽器或電子耳蝸，使患兒聾而不啞，與人正常交流溝通。